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2×Taq PCR MasterMix

一. 试剂盒组成、储存、稳定性:

产品目录号产品名称规格价格
PT002-102x Taq PCR Master Mix (含染料)10 x 1ml¥390
PT002-1002x Taq PCR Master Mix (含染料)100 x 1ml¥3,500

储存:-20 ℃ 保存。浓度: 0.1U/µl

二. 产品介绍:

本产品是由Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg2+、PCR Buffer以及PCR稳定剂和增强剂组成的浓度为2×的预混体系。具有操作简单快捷,灵敏度高,特异性强,稳定性好等优点,并可最大限度地减少人为误差和污染。

本产品使用方便快捷,能避免 PCR 操作过程中的污染,使用时只需取适量2×Taq PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。

2×Taq PCR Master Mix(含染料):已加入红色染料,反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。

2×Taq PCR Master Mix(不含染料):没有添加任何示踪染料,电泳时需要加含有示踪染料的上样缓冲液。

扩增的PCR产物3′端自动加“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。主要适用于PCR法扩增DNA、DNA序列测定等实验。

产品主要成分:Taq DNA Polymerase (recombinant):0.1units/µl ;MgCl2: 4mM ;dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM

三. 产品特点:

独创的MasterMix配方使扩增产物得率高,重复性强,稳定性好,操作更加简单快捷,灵敏度高,特异性强,稳定性好。

四. 质量控制:

经检测无外源核酸酶活性,PCR方法检测无宿主残留DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因,室温放置一周,无明显活性改变;

五. 适用范围:

基因检测:本产品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测。

DNA扩增和一些有特殊结构的复杂模板和GC含量高(>60%),有二级结构等的扩增:DNA片段的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定等。PCR产物带A,纯化后可直接用T/A载体克隆。

六. 使用方法:

以下举例仅供参考,实际反应条件因模板,引物等的结构不同而异,需根据实际情况,设置最佳反应条件。

1.实验方案:

用2xTaq PCR Mastermix,以人基因组DNA为模板,扩增1kb片段,反应体系25ul(如反应体系不同,可按此比例增加和减少用量)

2.PCR反应体系:

试剂25µl反应体系25µl反应体系
2xTaq PCR MasterMix12.5µl25µl
Forward Primer0.1-1µl2µl
Reverse Primer0.1-1µl2µl
Template DNA10pg-1µg﹤1µg
RNase-free water(ddH2O)Up to 25µlUp to 50µl

Note:引物浓度请以终浓度0.1-1.0uM作为设定范围的参考,扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度,发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

3.PCR反应条件:

步骤温度时间
预变性94℃3min
变性94℃ 30s}30cycles
退火55-65℃30s
延伸72℃1-2kb/min
终延伸72℃5min

4.结果检测:

反应结束,取5ul反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。